一、斑点金免疫渗滤测定法原理

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种新型的免疫标记技术。将被检抗体（血清或血纸浸出液）直接点样在硝酸纤维素膜上，滴加胶体金标记的血吸虫抗原，特异性抗原与抗体很快结合，在反应处发生金颗粒聚集，1～2分钟左右形成肉眼可见的红色斑点。该技术快速、简便、敏感、特异、检出率高、结果可靠，可应用于牛、羊、猪等家畜血吸虫病检测。

二、诊断试剂盒组成

1、塑料反应盒                   80块

2、甲液                         20 ml/瓶×1瓶

3、乙液                         10 ml/瓶×1瓶

三、操作步骤及方法

1、取塑料反应盒，编上相应血样号。

2、点样

（1）血清样品：用内径1毫米左右毛细管（塑料或玻璃均可）沾取血清，轻贴反应盒圆孔中央，待血清渗入膜直径达2毫米，向上移走点样器，反应盒放置10～15分钟。

（2）血纸样品：裁取血纸圆片（0.24厘米²）1片，投入试管或青霉素瓶内，加3毫升蒸馏水，浸泡至纸片变白（约20～25分钟）后摇匀，点样方法与放置时间同血清样品。

3、往反应盒圆孔中央加甲液2滴。

4、待甲液渗入后，再加乙液2滴。

5、待乙液渗入后，再加甲液1滴，观察记载。

四、结果判断

斑点依颜色深浅可记为++++     、+++   、++  、+、±、－（参考反应图谱）。++ 以上判为阳性。

五、注意事项

1、甲液、乙液置4～8℃保存，保存期暂定5个月；反应盒需密封、防尘，置阴凉处（4～20℃）保存。

2、血样须新鲜；点样时不要重压膜，点样后须至少放置10～15分钟方可滴甲液，让其充分吸附在膜上。加乙液后，需放置1分钟左右才可滴加甲液，以免胶体金与抗体没结合牢而被洗掉。

3、点样用过的毛细管立刻用蒸馏水或自来水充分冲洗，用滤纸吸干，可再使用。

4、滴加乙液前须轻摇。

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