禽流感诊断监测方法很多,各种方法都有各自的应用范围,有各自的优点和局限性。现将各种方法作一总结,在诊断监测工作中,应根据具体工作需要采用合适的方法。禽流感各种检测方法的比较见下表。 禽流感各种检测方法汇总表
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检测方法 |
检测对象 |
依据标准 |
适用性与局限性 |
所用试剂 |
试剂来源 |
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琼脂扩散(AGID)试验 * |
A型AIV抗体 |
GB/T18936 |
方法简单,敏感性低 |
型抗原、抗血清 |
哈尔滨兽医研究所 |
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血凝(HA)及血凝抑制( HI )试验 * |
血凝素亚型抗原、抗体 |
GB/T18936 |
鉴定 HA 亚型,直观反映抗体水平,有明显交叉反应 |
血凝素抗原、抗体 |
哈尔滨兽医研究所 |
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间接 ELISA* |
A型AIV抗体 |
NY/T 770 — 2004 |
敏感性高,适合批量测定 |
ELISA
试剂盒 |
IDEXX 元亨公司 |
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免疫胶体金试纸 |
A型AIV抗原 |
适合现场快速诊断 |
胶体金
试纸条 |
世纪元亨公司 |
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免疫荧光(IF)试验 |
组织、细胞病毒抗原 |
诊断速度较快,受主观经验影响大,不易掌握 |
抗 AIV
荧光抗体 |
国内无试剂 |
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免疫酶渗滤法 |
A型AIV抗原 |
诊断速度较快,步骤比胶体金试纸多,适合小样本量测定 |
免疫酶
试剂盒 |
国内无试剂 |
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RT-PCR* |
病毒基因 |
NY/T 772 — 2004 |
速度较快,可以鉴定亚型。 |
RT-PCR 试剂盒 |
农业部兽医诊断中心 |
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荧光RT-PCR |
病毒基因 |
GB/T19438.1-2004 (通用) ; GB/T19438.2-2004 ( H5 ) GB/T19438.3-2004 ( H7 ) GB/T19438.4-2004 ( H9 ) |
敏感度比常规 RT-PCR 高。但成本高,仪器昂贵。 |
荧光 RT-PCR 试剂盒 |
北京出入境检验检疫局 |
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NASBA |
病毒基因 |
GB/T19440-2004 (通用)
GB/T19439-2004 ( H5 ) |
高敏感性,操作烦琐,易产生假阳性 |
NASBA 试剂盒 |
上海出入境检验检疫局 |
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病毒分离 * |
病毒 |
GB/T 18936 |
可最终确诊,周期长 |
鸡胚 |
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注:“ *”表示该方法为OIE诊断试验和疫苗标准手册中收录的方法。
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